图4

（A）用3MA（10 mM）、CQ（20μM）或Wortmannin（WTM，1μM）预处理A549细胞30 min，然后用Chal-24（8μM）再处理30 h。通过LDH释放试验检测细胞毒性。所示数据为平均值±标准偏差。*p<0.01。（B）用不同的抑制剂（CQ，20μM；WTM，1μM；3MA，10 mM）预处理A549细胞30 min，然后用Chal-24（8μM）再处理2 h。用Western blot检测指示蛋白。β-actin被检测为输入对照。（C、D）用指示的siRNA（10nM）转染细胞30小时，然后用Chal-24（8μM）再处理30小时。通过LDH释放测定检测细胞毒性。所示数据为平均值±标准偏差。*p<0.01。插入物，通过Western blot确认每个蛋白的敲除。β-actin被检测为输入对照。（E） ●●●●。用指示的siRNAs（10 nM）转染A549细胞30 h，然后用Chal-24（3μM）处理3天，然后在每3天刷新一次的新鲜培养基中培养。培养8天后，用甲醇固定细胞并用亚甲基蓝染色。显示了整口井的代表性图像。