图5

（A） C2C12细胞在RSV（100µM）存在或不存在的情况下培养6小时，然后进行蛋白质印迹分析SOD2蛋白水平。（B） 培养的新生大鼠心室肌细胞SOD2免疫染色的代表性图像（上部）和量化数据（下部）。细胞在载体（Ctrl）、白藜芦醇（RSV）或烟酰胺（NA）存在下培养48小时。比例尺：10µm。（C） RT-PCR分析转染阴性对照siRNA（Ctrl）或针对FOXO1（F1）、FOXO3a（F3a）或FOXO4（F4）的siRNA的C2C12细胞中的FOXO转录因子。（D） 实时RT-PCR定量分析C2C12细胞（N=6）中SOD2 mRNA。用抗阴性对照（Ctrl）、FOXO1（F1）、FOXO3a（F3a）或FOXO4（F4）的siRNA转染细胞后，用白藜芦醇（RSV，30µM）预处理细胞3小时，然后用抗霉素A（AA，50µM。（E） SOD2的免疫印迹分析。用对照siRNA（Ctrl-siRNA）或siRNA转染的C2C12细胞对抗所有三种FOXO（FOXO1、FOXO3a、FOXO4），用载体或RSV（30µM）预培养3小时，然后用AA（50µM，无血清）处理24小时。全细胞裂解物进行免疫印迹分析。（F） CM-H的代表性图像₂DCFDA染色的C2C12细胞。用载体或RSV（30µM）预处理3小时后，用AA（200µM。比例尺：10µm。（G） CM-H的量化₂DCFDA（DCF）荧光。数据来自三个独立的实验。（H） C2C12细胞中乙酰-FOXO1和FOXO1的免疫印迹。细胞用载体、抗霉素A（AA，60µM）或RSV（30µM，+AA）处理（左面板），或在曲古菌素A（TSA）存在下用载体或烟酰胺（NA，20 mM）培养（右面板）。（一） 用带有或不带有RSV的载体或AA处理的C2C12细胞中FOXO3a和FOXO4的代表性免疫印迹。***p<0.001，**p<0.01。n.s.=不重要。a.u.=任意单位。