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科学。作者手稿;PMC 2013年9月15日提供。
以最终编辑形式发布为:
科学。2013年3月15日;339(6125): 1323–1328.
2013年2月21日在线发布。 数字对象标识:10.1126/科学.1228792

图2

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mTORC1基因或胰岛素刺激激活对代谢流量的影响从头开始嘧啶合成途径

(A类)标准化峰面积15N-标记代谢物,通过LC/MS/MS测量,提取自Tsc2型+/+Tsc2型-/-MEF在无血清条件下生长15小时,在过去1小时内使用载体(DMSO)或雷帕霉素(20 nM)治疗,并在15分钟内脉冲标记15N-谷氨酰胺。

(B类)标准化峰面积15来自野生型MEF的N标记代谢物如上所述处理,但在需要时用胰岛素(100 nM)刺激1小时。

(C类)标准化峰面积13C标记的代谢物来自按(A)处理的细胞,但15分钟脉冲标记为[4-13C] -代谢物提取前的天冬氨酸。

(D类)单峰归一化峰面积13C标记代谢物来自按(A)处理但经雷帕霉素处理1小时或15小时的细胞,并用[1,2脉冲标记15分钟-13C] -提取代谢物之前的葡萄糖。

(A-D公司)所有数据均以每种条件下三个独立样本的平均值±SEM表示*P(P)使用双尾学生的成对比较<0.05t吨测试(N个=3),所有P(P)-中提供的值表S3.

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