mTORC1对N-氨甲酰天冬氨酸丰度的影响(A-C公司)来自Tsc2型+/+和Tsc2型-/-MEF在无血清条件下生长15小时，并用载体（DMSO）或雷帕霉素（20 nM）处理。LC/MS/MS分析了每种情况下三个独立样本的细胞内代谢物Tsc2型-/-相对于Tsc2型+/+单元格(A类)或在中减少Tsc2型-/-15小时内(B类)或1小时(C类)雷帕霉素治疗显示为根据p值排列的行正常化热图。请参见表S1获取这些样品的完整代谢产物谱。
(D类)的示意图从头开始嘧啶合成途径和碳氮源并入嘧啶环（见下文）。
(E、 F类)通过LC/MS/MS测定mTORC1抑制剂对N-氨甲酰天冬氨酸稳态水平的影响Tsc2型-/-稳定表达K-Ras的MEFs（E）或MCF10A细胞G12伏或PI3KCAH1047R型（F） 在15小时血清饥饿和用雷帕霉素（20nM）或DMSO处理1小时之后。
(G公司)如上所述，在血清饥饿15 h并用强力霉素（1μg/mL）或雷帕霉素（20 nM）治疗最后8 h后，在稳定表达强力霉素诱导PTEN的U87MG细胞中测量N-氨甲酰天冬氨酸水平。
(电子-G)数据显示为一式三份样品的平均值±SEM，免疫印迹如下。MetaboAnalyst和GENE-E软件用于协助代谢物数据分析。全部P（P）-两两比较的值使用双尾Student’st吨测试(N个=3).
