内源性L-谷氨酰胺外流调节MCF7细胞S6K1活化
(A) MCF7细胞缺乏氨基酸,按指示处理(1小时)并进行S6磷酸化定量处理。
(B) 在缺乏或存在50 mM D-Phe的情况下,用EAA处理饥饿的MCF7细胞不同时间。
(C) 用标记的L-亮氨酸/EAA(填充圆圈)或饥饿培养基(星形)处理饥饿的MCF7细胞不同时间,并处理条件培养基以定量L-谷氨酰胺。
(D) MCF7细胞按(C)中的方法处理,并在L-谷氨酰胺(黑圈)或标记L-亮氨酸(红圈)定量所指示的时间提取。
(E) 按照指示处理饥饿的MCF7细胞,并使用western blotting分析S6K1激活。
带误差条的数据表示平均值±SD。