RNAi介导的SLC1A5、SLC3A2或SLC7A5下调抑制氨基酸转运和mTOR通路活性
（A） 用指示的siRNA转染的HeLa细胞是氨基酸缺乏的（开放条），并用含有1mM L-谷氨酰胺的EAA处理60分钟（红色条）。S6的磷酸化235/236系列使用Delfia读数进行量化。
（B） 在siRNA转染（96小时）后，分析S6K1磷酸化。
（C） 按照指示处理转染siRNAs的细胞（1小时），并分析cap翻译复合物。
（D） 用打乱或SLC1A5_1 siRNA转染的细胞饥饿，并用标记的L-谷氨酰胺预培养（1小时）。提取细胞以定量标记的L-谷氨酰胺摄取（开放条），或用标记的L-亮氨酸/EAA处理细胞（2.5分钟）以定量标记L-谷氨酰胺流出（填充条）。
（E） 用指示的siRNAs转染细胞，饥饿并用标记的L-谷氨酰胺（孵化棒）或饥饿培养基（填充棒）预处理1小时，清洗，然后用0.4 mM标记的L-亮氨酸处理2.5分钟。处理细胞提取物以绝对定量L-亮氨酸。
（F） 用siRNAs（非沉默，NS）转染HeLa细胞72小时，并收集用于细胞大小定量。
（G） 显示了三个独立实验的细胞大小数据（平均值±SEM）。
（H） 在TSC2 siRNA存在或不存在的情况下，用scramble、mTOR、SLC1A5或SLC7A5 siRNA转染HeLa细胞，并进行细胞大小定量处理。
（一） 用siRNA转染载体表达（模拟）或RNAi不敏感的GFP-SLC1A5表达的HeLa细胞（克隆L1和L2），并进行细胞大小定量处理。
所示数据（平均值±SD）代表三个独立的实验。
