HEK-293细胞中nSMase2的过表达，而不是nSMase1或nSMase3的过表达改变了细胞鞘脂水平将稳定表达载体nSMase1（NSM1）、nSMase2（NSM2）或nSMase3（NSM3）的HEK-293细胞接种48 h(A类)和神经酰胺(B类)如材料和方法一节所述，使用LC-MS/MS分析水平。脂质水平归一化为总磷酸脂。结果表示为脂质pmol/磷酸盐nmol，为平均值±S.E.M(**P（P）< 0.01,n个= 3). (C类)用nSMase1、nSMase2或nSMase3瞬时转染HEK-293细胞24小时。转染效率通过间接免疫荧光和共聚焦显微镜测定，蛋白表达通过免疫印迹测定，如材料和方法部分所述。共聚焦图像代表四个独立实验中每个实验中至少五个场；免疫印迹是四个独立实验的代表。分子质量标记（kDa）显示在左侧。(D类)用nSMase1、nSMase2或nSMase3瞬时转染HEK-293细胞48 h。用LC-MS/MS分析细胞神经酰胺水平。结果是平均值±S.E.M.总神经酰胺水平归一化为总磷酸脂。(**P（P）<0.01，采用Dunnet事后检验的单因素方差分析，n个= 4).
