图6

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上皮细胞和基质细胞是表达HSC标志物的细胞的后代。

(A类)αSMA-核心-ERT2段x只ROSA-Stop-flox-YFP小鼠接受假手术或14天BDL治疗,并用载体或TMX治疗。对YFP进行免疫组化,并显示代表性图像(原始放大倍数×40[i–i])。方框区域显示门脉周围区域的导管细胞(v;箭头)和中区的肝细胞和基质细胞(vi;分别为黑色和红色箭头;原始放大倍数×100[v和vi])的代表性YFP染色放大倍数增加。还显示了车辆处理控制装置(分别为ii和iii)。(B类)野生型、ROSA-Stop-flox-YFP(无Cre)和αSMA-Cre-ERT2段/ROSA-Stop-flox-YFP(DTG-YFP)小鼠接受假手术或BDL,并用载体或TMX治疗。BDL后14天分离原代肝细胞,并通过流式细胞术分析直接YFP荧光。显示了YFP阳性细胞相对于WT对照的百分比。(C类)从ROSA-Stop-flox-YFP和DTG-YFP小鼠中分离肝细胞;通过PCR分析DNA以检查ROSA26位点的重排(灰色三角形表示LoxP位点)。一个普通正向引物与2个下游引物一起用于指定区域(PGK-Neo,EYFP;补充表3)。如图所示,对Cre介导的重组进行量化图11显示在每条车道下方。(D类)此外,还对14天BDL损伤的GFAP-Cre-ERTM x ROSA-Stop-flox-YFP小鼠进行了血统追踪,并用溶媒或TMX治疗。对肝脏YFP进行免疫组化,并显示了代表性的YFP图像+导管区(箭头)、基质区(红色箭头)和肝细胞区(黑色箭头)的细胞(原始放大倍数,×40[顶部];×100[底部])。