图3

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miR-122通过靶向3′-UTR下调P4HA1的表达P4HA1型信使核糖核酸

(A) qPCR检测miR-122转染细胞中胶原1A1的mRNA表达。每组n=6。CCl患者肝脏P4HA1的(B和C)mRNA(B)和蛋白(C)表达水平4-用qPCR和Western blot分析经处理或经油处理的CD-1小鼠。每组n=6。用qPCR和Western blot分析培养的活化HSC中P4HA1的(D和E)mRNA(D)和蛋白(E)表达水平。每组n=6。用qPCR和Western blot分析CBDL激活的HSC中P4HA1(F和G)mRNA(F)和蛋白(G)的表达水平。每组n=6。用miR-122模拟物或非特异性对照miRNA模拟物转染(H和I)HSC。P4HA1型24 h后(h)用qPCR分析mRNA表达;在处理后36小时通过蛋白质印迹测定P4HA1的蛋白质表达水平(I)。n=3。第页<0.05 (与。控制miRNA)。(J) 用荧光素酶构建物转染HSCP4HA1型-3′-UTR,在存在miR-122模拟物或非特异性对照miRNA模拟物的情况下。转染24小时后进行荧光素酶检测。(K) HSC转染有P4HA1型-在存在miR-122模拟物或非特异性对照miRNA模拟物的情况下,构建具有miR-122结合位点缺失的3′-UTR荧光素酶。转染24小时后进行荧光素酶检测。面板中显示的数据代表平均值±SE。n=3;第页<0.05 (与。控制miRNA)。美国,未经治疗。