图1

A） 放射自显影显示了从心脏、肝脏、纹状体和尾部提取的DNA的典型SP-PCR分析。断奶时，B6.Cg-R6/1（B6）和CBy。Cg-R6/1（CBy）同源小鼠分别包含在尾部DNA（CAG）98和94中。为了进行比较女士2图中显示了−/−鼠标。在每个反应中，用引物MS-1F和MS-1R扩增约5-10个DNA可扩增分子。动物20周大。B） 同类CBy。将Cg-R6/1小鼠与B6杂交，并将产生的F1后代杂交，以产生具有所有可能基因型的F2小鼠女士3轨迹。通过使用荧光标记引物扩增10 ng基因组DNA并通过毛细管凝胶电泳解析片段来检测重复不稳定性(图1B). 使用这种高分辨率方法，重复长度分布呈现典型的“刺猬”模式(例如 [10],[13],[15],[16]此模式反映了样本中的体细胞镶嵌和由塔克聚合酶滑移[62],[63]PCR人工制品主要是重复收缩，因此这里不考虑这些。CAG重复不稳定性的模式取决于MSH3位点的基因型。B6纯合子导致最大的不稳定性，CBy纯合子造成扩展不足，而杂合子导致中间不稳定性，表明基因剂量效应女士3轨迹。数字表示对应于主要峰值的CAG重复大小。此外，在B6追踪中，第二个数字表示检测到的最高CAG重复数。C）Msh3女士多态性女士3来自C57BL/6（B6）和BALB/cBy（cBy）小鼠的基因。发起人是相同的。SNP被识别或确认为数据库SNP通过对Msh3女士基因。