图3

一，在每个组中，293T细胞要么未转染（泳道1），要么用指示的pri-miRNA和0.5μg pCMV-Flag空载体共转染（泳道2），要么用指示的pri-miRNA和0.5μg Flag-Lin-28 cDNA共转染（泳道3）。转染后40小时收集总RNA，并对所指示的miRNA进行Northern印迹。b条，a）中样品的pri-let-7g水平的qPCR分析（右上图）。c（c）用定量PCR测定293T细胞与pri-let-7g和pCMV-Flag、Flag-Lin-28、Flag-hnRNPA1、Flag-hnRNPL、Flage-YBX-1或Flag-Msi-2 cDNA共转染后的成熟let-7g水平。首先，相对于未转染的对照细胞计算每个样本中成熟let-7g的数量，然后将Flag-protein联合转染的样本归一化为相应的pCMV-Flag联合转染样本。d日，qPCR显示在293T细胞中转染Flag-Lin-28后内源性成熟miRNA水平的变化。e（电子），qPCR显示在293T细胞中转染Flag-Lin-28后内源性pri-let-7g积聚。对于c-e公司，数值为两个或多个独立转染的平均+/-S.E.M。