p53或p16的表达足以导致层粘连蛋白B1的丢失，这在mRNA水平上受到调节。（A） p53稳定足以导致层粘连蛋白B1下降。用5μM坚果蛋白-3a或载体（PRE）处理HCA2细胞。连续处理4天后，通过Western blotting分析全细胞裂解物。（B） 异位p16INK4A（墨水）这种表达足以引起层粘连蛋白B1的下降。HCA2细胞被缺乏插入物（PRE）或表达p16的慢病毒感染INK4A（墨水）（第16页INK4a公司OE）并选择。感染4天后，用Western blotting分析全细胞裂解物。（C） 层蛋白裂解产物存在于凋亡细胞中，但不存在于衰老细胞中。用500nM staurosporine处理HCA2细胞24h诱导凋亡（Stauro）或照射4d后收集（SEN（XRA））。对前新生对照组（PRE）进行模拟照射。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。（D） 半胱天冬酶抑制可防止葡萄孢霉素诱导的层粘连蛋白B1降解，但不能阻止衰老相关层粘连肽B1的下降。HCA2细胞用500 nM staurosporine处理24小时（Stauro）或照射4天后收集（SEN（XRA））。对前新生对照组（PRE）进行模拟照射。如有指示，从staurosporine/XRA之前开始添加泛酶抑制剂z-VAD-fmk（z-VAD；100μM），直到收集到全细胞裂解物。每天更换Z-VAD-fmk。（E） 衰老细胞中的层粘连蛋白B1 mRNA下降。HCA2和IMR-90细胞接受模拟辐射（PRE）或XRA处理。4天后分离总RNA，并通过定量逆转录-PCR进行分析。信号正常化为微管蛋白。（F） 衰老细胞中的层粘连蛋白B1 mRNA稳定性降低。HCA2细胞接受模拟辐射（PRE）或XRA处理。三天后，添加放线菌素D（最终1μg/ml）以停止转录。24小时后，分离总RNA并通过定量RT-PCR进行分析。添加放线菌素D前的转录水平设置为100%。
