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层粘连蛋白B1的缺失与多种类型的细胞衰老有关。(A) 拉明B1降低DNA损伤诱导的衰老。HCA2细胞接受模拟照射(PRE)或照射(10-Gy x射线)并允许衰老(SEN(XRA))。使用识别C末端表位的两种无关的层粘连B1抗体中的任何一种,通过Western印迹分析全细胞裂解产物。(B) 拉明B2不会降低DNA损伤诱导的衰老。HCA2细胞被模拟照射(PRE)或照射并允许衰老(SEN(XRA))。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(C) SEN(XRA)细胞中的层粘连蛋白B1下降。BJ细胞被模拟照射(PRE)或照射并允许衰老(SEN(XRA))。使用识别内部表位的第三种层粘连B1抗体,通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(D) 拉明B1在复制衰老中下降。HCA2细胞培养至复制性衰老(SEN(REP);~70人口翻倍)。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(E) 拉明B1在RAS诱导的衰老中下降。HCA2细胞被缺乏插入物(PRE)或表达致癌RAS的慢病毒感染V12版本并允许衰老(SEN(RAS))。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(F) 在MKK6诱导的衰老中,层蛋白B1下降。HCA2细胞被缺乏插入物(PRE)或表达组成活性MAP激酶激酶6突变体(MKK6EE)的慢病毒感染,并允许衰老(SEN(MKK 6)。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(G) XRA后WI-38细胞中的层粘连蛋白B1下降。照射WI-38细胞(SEN(XRA))并使其衰老。模拟照射PRE细胞。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(H) 层蛋白B1在静止细胞中不下降。HCA2细胞在含有10%血清(PRE)的培养基、无血清培养基中培养48 h以诱导静止(QUI),或照射并允许衰老(SEN(XRA))。通过Western blotting分析全细胞裂解产物。(一) 辐照诱导衰老后48h内,层蛋白B1下降。对HCA2细胞进行模拟照射(PRE)或照射(XRA)。通过Western blotting分析在指定时间点收集的细胞核(N)和细胞质(C)提取物。RPA用作核馏分的装载控制;微管蛋白作为细胞质部分的负载控制。

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