图4。

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M337V神经元具有较高水平的可溶性和耐洗涤剂TDP-43。(A类B类)M337V-1、M337V-2和Cont-2 MN培养物的Western blot分析。每个细胞系显示三个独立的提取。β3-管蛋白是可溶性组分的负荷控制(A类)和Ponceau S可逆膜染色(51)是耐洗涤剂组分的负载控制(B类). 利用ImageJ完成了波段信号强度的半定量分析。(A类)可溶性TDP-43水平标准化为β3-微管蛋白,Cont-2设置为1:M337V-1=3.67±0.58;M337V-2=4.54±0.01;Cont-2=1.0±0.24。M337V-1 vs.M337V-2,不显著;M337V-1与Cont-2,P(P)= 0.013; M337V-2与Cont-2,P(P)< 0.001,n个=3次独立提取。(B类)耐洗涤剂TDP-43标准化为Ponceau S,Cont-2设置为1:M337V-1=1.52±0.08;M337V-2=1.67±0.10;Cont-2=1.0±0.16。M337V-1 vs.M337V-2,不显著;M337V-1与Cont-2,P(P)= 0.04; M337V-2与Cont-2,P(P)< 0.03,n个=3次独立提取。数值为平均值±SEM。数据通过单向方差分析和事后Tukey检验进行分析。(C类D类)SMI-32细胞核TDP-43的免疫荧光分析+和SM-I32细胞。续2 SMI-32+(118.89%±2.6%)与SMI-32相比(100% ± 2.9%),P(P)< 0.001,n个=每组40个细胞。(E类)M337V iPSC衍生SMI-32+MNs主要表现为细胞核TDP-43定位,胞体和轴突中存在颗粒染色。(F类)通过一个TDP-43 M337V SMI-32的正交视图+显示TDP-43(绿色)、SMI-32(红色)和DAPI(蓝色)定位的单元格。(比例尺:10μm)