图2

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通过定点突变筛选磷酸化位点

(A类)PICK1示意图显示了潜在磷酸化位点的近似定位,以及显示NetPhos 2.0预测的磷酸化潜能得分的表格。PKCα突变体的检测在体外磷酸化测定(B类),CaMKIIα在体外磷酸化测定(C类). 上部面板为代表性SDS-PAGE,显示32P掺入和昏迷染色。下部面板显示了相对于WT的定量磷酸化水平。数据是n=3-5的平均值±S.E。S77突变导致PKCα介导的磷酸化水平显著降低(S77A:48%±7.7%,n=3,S77D:39%±7.7%;平均值±SE n=4),*表示P<0.05,**表示P<0.01(单因素方差分析,然后进行Dunnett多重比较测试)。每个n代表一个独特的蛋白质批次。