mTORC1在丝氨酸142处磷酸化TFEB（S142）。(A类)Torin 1诱导S142去磷酸化。按照指示处理HeLa细胞，用TFEB p-S142磷酸抗体和抗FLAG抗体探测总提取物和核提取物。饥饿或Torin 1处理后TFEB S142磷酸化消失与TFEB在核部分的积累相关。(B类)mTORC1型体外激酶分析。高纯度FLAG–S6K1、TFEB–3×FLAG或TFEBS142A系列–3×FLAG与不含激酶的放射性标记ATP、纯化的mTORC1或mTORC1+Torin 1孵育，并通过放射自显影分析。下面板显示底物的FLAG免疫印迹。(C类)TFEB蛋白结构与预测的mTORC1磷酸化位点及其在脊椎动物中的保守性的示意图。编号依据人类亚型1。(D类)磷酸位点的序列保守性得分以及mTOR共有基序和TFEB磷酸位点周围序列之间的定量一致性。(E类)S142和S211规定了TFEB定位。表达丝氨酸-丙氨酸突变型TFEB–3×FLAG的HeLa细胞的FLAG免疫染色（红色）。细胞核用DAPI（蓝色）染色。值是包含至少50个转染细胞的五个字段的平均值。学生的t吨-测试（未配对）***P（P）<0.001. 比例尺代表30μm。
