溶酶体应激诱导TFEB核易位。(A类)表达TFEB–3×FLAG的HEK-293T细胞的免疫荧光,经过指定的处理,并用FLAG抗体和溶酶体标记LAMP2染色。合并中的FLAG和LAMP2通道分别为绿色和红色。合并中包括DAPI(蓝色)。比例尺表示10μm。(B类)用核TFEB–3×FLAG定量四种条件下的细胞数量(A类). 每个值表示三个独立字段的平均值±标准差N个=300. (C类)按指示处理的HEK-293T细胞的免疫荧光,并用抗内源性TFEB和溶酶体蛋白RagC的抗体染色(合并中分别为绿色和红色)。DAPI包含在合并中。比例尺代表10μm。(D类)用二甲基亚砜、氯喹(CQ)或SalA处理表达TFEB–3×FLAG的HeLa细胞提取的蛋白质进行免疫印迹,进行核/细胞溶质分离,并用FLAG抗体进行印迹以检测TFEB。H3和微管蛋白分别用作细胞核和胞质标志物。印迹是三次重复实验的代表。