图5

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siRNA下调SIRT1对细胞凋亡和MDR相关分子的影响。

(A) 用干扰siRNA(SCR)或SIRT1 siRNA(siSIRT1)转染SGC7901-ATF4细胞。72小时后,将细胞在新鲜培养基中以5µg/ml的浓度在无或有顺铂的情况下再培养36小时。药物治疗后,用Annexin V和PI标记细胞。FACS分析确定活细胞和凋亡细胞的分布模式。(B) 以同样的方法转染A段SGC7901-ATF4细胞,然后用5µg/ml顺铂处理36 h,然后进行Hoechst 33258核染色检测凋亡细胞。(C) 在A段以相同的方式转染SGC7901-ATF4细胞,并在含有10µg/ml顺铂的新鲜培养基中再培养6–24小时。在指定的时间,收集蛋白质提取物,并对caspase-3(未分离和裂解形式)进行免疫印迹分析。β-actin作为内部对照。(D) 在A段以相同方式转染SGC7901-ATF4细胞。72小时后,用所示抗体印迹细胞裂解物。β-actin作为内部对照。