表2。只有一小部分DotF相互作用物促进Cre的细菌间转移

质粒*

公里R†

Gm公司s/秒

FFX18型

7

0/7

FFX19型

0/3

FFX49型

4

0/4

FX50型

5

0/5

FX3型(sidA公司)

210

34/40

FX6(FX6)

7

第0页,共7页

FX9(FX9)

6

0/6

外汇10(sidA公司)

170

41/46

FX12型

5

0/5

FX16型

4

第0页,共4页

FX22型

5

0/5

FX23(FX23)(sidB公司)

620

38/40

FX26型

4

0/4

FX36型(sidD公司)

370

40/40

FX46型

7

0/7

FX48型

4

0/6

FFX10型(sidF公司)

750

0/4

所示为一个典型实验,其中嗜肺军团菌携带上述质粒的Lp02菌株包含与cre公司与接受者一起孵化嗜肺军团菌携带漂浮报告质粒的菌株(材料和方法在正文中)。含有规定数量细菌的易位混合物(材料和方法在正文中),将其涂布在含有卡那霉素和蔗糖的培养基上,并测定产生的菌落数(KmR(右)). 这些菌落代表由于在液氧或自发产生的突变体。为了区分这两种可能性,采集菌落并将其置于含有庆大霉素的培养基上。如果发生了重组事件,则KmR(右)应变也应为Gm.

*用DotF(28-123)作为诱饵,在双杂交系统中分离出带有F标签的质粒,而用全长DotF作为诱饵分离出带有FF标签的克隆。然后将插入物移入Cre融合载体pZL180中。

在特定实验中获得的对卡那霉素和蔗糖均具有抗性的菌落数量。

对庆大霉素敏感的卡那霉素耐药菌落的比例。真正的重组体应该是Gm将卡那霉素/蔗糖平板上的单个菌落贴在含有20g/ml庆大霉素。