图9

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转录率分析热休克蛋白70hsp90αHsp70 AAAA突变过度表达细胞中的基因。(A类)野生型Hsp70和AAAA突变体示意图。HSF1激活域的结合活性(图。(图2A)2A) 并指出了突变的残基。(B类)hsp90α基因检测采用连续转录分析。PERTA70–AAAA细胞在含有或不含多西环素(+AAAA或−AAAA)的培养基中保存24小时,然后在42°C热休克处理0、15和60分钟(C类)凝胶迁移率测定法测定的DNA结合活性。(D类)HSF1 DNA结合活性的抗体超位移。仅显示了与HSF1 DNA结合复合物相对应的凝胶顶部。(E类)用Hsp70特异性抗体4G4进行Western blot分析,测定强力霉素诱导24小时的Hsp70 AAAA突变体水平,并与从培养基中取出脱水四环素48小时后诱导的野生型Hsp70水平进行比较。