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2011年4月5日在线发布。 数字对象标识:10.1038/emboj.2011.104

图6

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线粒体呼吸缺陷损害了氨基酸饥饿下Atg1–Atg13复合物的PAS募集。(A类)自动液位计8诱导独立于Atg1–Atg13复合物和自噬流量。野生型,rho0, Δatg1处, Δ第7天, Δ第9天和Δ第11天含有pr的细胞自动液位计8-GFP-ATG8按中所述进行分析图1A四种方法的平均值和标准差(n个=4)指示进行独立实验。(B类)Atg1和Atg13对PAS的补充依赖于线粒体功能。野生型和rho0含有pr的细胞自动液位计8-GFP-ATG8和公关在g1-在g1-mCherry(上部面板)或prATG13公司-ATG13公司-mCherry(下面板)暴露于补充半乳糖的氨基酸饥饿培养基中3小时。野生型细胞在饥饿2.5小时30分钟后用抗霉素A(AA 30′)处理,或用寡霉素(O)处理3小时。箭头表示GFP-Atg8点的位置。透射和荧光显微镜图像叠加,以可视化细胞边界。比例尺代表1.5μm。(C)氨基酸饥饿期间Atg1-和Atg13-mCherry的稳定水平。野生型,rho0和Δ第7天表达pr的细胞在g1-在g1-mCherry(上部面板)或prATG13公司-第13页-mCherry(下部面板)暴露在外,并按照(B类)并使用α-dsRed和α-Cdc11抗体进行全细胞提取和western blot分析。

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