图2。

谷氨酰胺酶沉默通过丙酮酸羧化酶（PC）增加葡萄糖依赖性恢复。(A类)使用气相色谱/质谱法测量L-[3培养细胞中柠檬酸和苹果酸的富集-¹³C] -谷氨酰胺(左侧)和D-[1,6-¹³C] -葡萄糖(赖特). 结果来自重复培养7小时的代表性实验。(B类)在D-[U培养期间，增加PC通量对谷氨酸C2（GLU2）总标记中四分位（Q）、2,3双位（D23）和1,2双位（D12）的分数贡献的预测效果-¹³C] -葡萄糖。数据是使用建模软件生成的tcaSIM公司假设TCA循环活跃，丙酮酸盐富集95%，并进行主动补骨术。对TCA循环的35圈进行了模拟。(C类)表达对照shRNAmir、针对GLS的shRNAmer或针对GLS和PC的shRNAmir的LN229细胞的蛋白质印迹(天)从细胞系中提取代谢物的核磁共振波谱C类用10 mM D-[U培养细胞-¹³C] -葡萄糖和4 mM未标记的谷氨酰胺维持8小时。插图突出显示了GLU2多重态。个别峰的分裂是长程耦合的结果。(E类)柠檬酸盐标签来自[1-¹³C] -丙酮酸在相同的三种细胞系中。柠檬酸盐m+1相对于未标记标准物的百分比（其中m+1=0%）绘制在年轴。每个培养物含有5 mM Na-[1-¹³C] -丙酮酸，4 mM谷氨酰胺，无葡萄糖。数据是三个7小时培养物的平均±SD。谷氨酸；Ala，丙氨酸；甘氨酸、甘氨酸；乳酸；S、 单线。