的电阻Bax、Bak双缺陷小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)对tBID诱导的凋亡。(A类)野生型亮场显微镜(×20倍放大),Bax公司−/− 贝克−/−,Bax公司−/− 贝克+/+、和Bax公司+/+ 贝克−/−在感染tBID表达载体24小时后,初生胚胎日13.5个MEF。将小鼠p15 BID和BAX克隆到逆转录病毒表达载体MSCV-IRES-GFP(pMIG)中(11). 如前所述,通过转染293GPG包装细胞系产生逆转录病毒(33). 转染后3天和5天收集含有逆转录病毒的上清液,并在聚布伦(8µg/ml)存在下用于感染MEFs。(B类)感染tBID载体24小时后,野生型(wt)和DKO MEF同一场(×40倍放大)的亮场和GFP荧光。(C类)感染pMIG(空载体控制)、tBID和/或BAX载体后24小时内MEF中细胞凋亡的定量。细胞死亡通过Annexin-V染色的流式细胞术检测(Bio-vision)进行定量。所示值为三个独立实验的平均值±1 SD。(D类)感染pMIG、tBID和/或BAX载体24小时后GFP阳性细胞的定量。流式细胞术检测GFP阳性细胞。所示值为三个独立实验的平均值±1 SD。(E类)SV40-转化的全细胞裂解物Bid抗体免疫印迹(34)感染pMIG或tBID载体后17小时的野生型和DKO MEF。