图1

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一种E3连接酶非活性RNF4片段,与多聚SUMO结合。(A类)SUMO依赖性泛素连接酶RNF4的结构域布局。显示了RING和SIM。下面是来自氨基酸32–133(RNF4wt)的RNF4片段和SIM突变片段(RNF4mut)。突变残基以粗体显示。(B类)用于洗脱包含PIASX蛋白SIM的聚SUMO结合物的SIM肽序列,在羧基末端添加三个氨基酸。(C类)RNF4片段的纯度通过SDS-PAGE测定。(D类)用RNF4wt和RNF4mut分离重组SUMO2链,然后用SIM肽洗脱。样品用SUMO2抗体进行免疫印迹。免疫印迹法;突变突变株;RNF4,环形填料4;SDS-PAGE、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;SIM,小泛素样修饰基相互作用基序;SUMO,小泛素样修饰物;wt,野生型。