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图1。

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H-ras公司V12版本-表达细胞依赖自噬生存饥饿。(A类)自噬能力(第5天+/+第7天+/+)或自噬缺陷(第5天−/−第7天−/−)表达H-ras的细胞V12版本或载体瞬时转染荧光自噬体标记物p-tFL-LC3,并进行饥饿处理。典型图像描述了RFP-LC3定位。数字表示LC3易位到自噬体的细胞百分比(点状定位)。(B类)内源性LC3-I到LC3-II的加工评估表明自噬诱导和caspase-3激活(凋亡)。(C类)用HBSS处理Ras-expressing细胞12–20 h,用台盼蓝排他细胞活力分析仪检测细胞活力,并在饥饿开始时将其归一化为未处理细胞。(D类)在中处理的单元格C类在正常培养基中恢复2d,并评估克隆存活率。

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