ULK1的AMPK磷酸化是营养剥夺后有丝分裂和细胞存活所必需的（A）将稳定表达小鼠野生型（WT）或催化非活性（KI）或AMPK非磷酸化（4SA）ULK1 cDNA的U2OS细胞或空逆转录病毒载体（v）以及抗内源性人类ULK1和ULK2的shRNA放在含有5mM苯丙氨酸（Phen）或载体的培养基中1h。如图所示，对裂解液进行免疫印迹。（B）将稳定表达WT、KI或4SA ULK1 cDNA的ULK1−/−MEF或空逆转录病毒载体（v）以及针对内源性ULK2的shRNA放置在EBSS饥饿培养基（饥饿）或对照培养基（ctl）中，在有或无BafilomycinA（BafA）的情况下放置6h，并按指示进行免疫印迹。（C）通过TEM和Inform形态计量软件分析来自（B）的细胞。线粒体伪红色，细胞质蓝色，细胞核绿色。（D）对在基础条件下用JC-1染色或以线粒体解偶联物CCCP为对照的（B）细胞进行荧光激活细胞分选（FACS）分析，以测量线粒体膜电位。受损的线粒体膜电位向左移动，正如在CCCP处理的细胞中观察到的那样。（E）将转染20nM siRNA池的野生型（WT）MEF放入通用对照（ctl）、小鼠Atg5或小鼠ULK1和ULK2中72小时，然后放置在饥饿培养基（starv）或标准培养基（ct1）中12小时，并通过AnnexinV-FACS对细胞死亡进行评分。（F）将来自（B）的细胞置于饥饿培养基（starv）或标准培养基（ctl）中12小时，并用AnnexinV-FACS对细胞死亡进行评分。（G）通过直接磷酸化ULK1和抑制mTORC1对ULK1的抑制，在双分支机制中激活ULK1 AMPK的模型。
