图2

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小鼠肝脏或原代小鼠肝细胞AMPK或ULK1基因缺陷会导致自噬缺陷。(A)对来自母鼠配对小鼠的肝裂解物进行免疫印迹以检测所示抗体。p62与肌动蛋白的比率,通过在免疫印迹上进行的密度测定计算。数据显示为平均值+/-SEM。*p<.01(B)来源于ULK1的原代肝细胞+/+或ULK1−/−小鼠或AMPKa1+/−a2类L(左)/+或AMPKa1−/−a2类升/升如方法所述,将其置于含有2mM二甲双胍(met)或载体(veh)的培养基中2h。用所示抗体对裂解液进行免疫印迹。(C)对所示基因型的原代小鼠肝细胞进行透射电子显微镜(TEM)检查,发现AMPK-和ULK1-缺陷细胞中线粒体积聚。线粒体伪红色,细胞质蓝色,细胞核绿色,脂滴黄色。(D)通过线粒体标记物TOM20(红色)和细胞核(蓝色)的免疫细胞化学染色,对指定基因型的原代小鼠肝细胞进行染色。比例尺,10微米。