图5

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缺陷线粒体是自噬降解的靶点。()将GFP-LC3稳定表达的HCT116细胞用丙酸盐(3 mM)或载体对照(PBS)处理24 h。线粒体用MitoTracker深红色染色,并通过荧光显微镜获得代表性图像。放大倍数,×600。箭头表示丙酸诱导细胞自噬。注意细胞内线粒体涂片染色,自噬激活,GFP-LC3点的形成反映了这一点。合并图像中的黄色表示GFP-LC3与线粒体共定位。处理后的细胞也用COXIV抗体染色(b条)用共焦显微镜进行有丝分裂检测。在有或无CQ(5)的情况下,用丙酸盐(3 mM)处理HCT116细胞μM) 48小时后,用COXIV/LAMP2对细胞进行染色(c(c))或COXIV/p62(d日)抗体。使用Olympus Fluoview共焦显微镜和×60浸油物镜获得代表性图像。在有或无CQ(5)的情况下,用丙酸盐(3 mM)处理GFP-LC3稳定表达的HCT116细胞μM) 在指定的时间内。流式细胞术分析GFP-LC3和MitoTracker深红色荧光(工程安装)GFP荧光增强和MitoTracker深红色染色减少的细胞比例以条形图表示(环境影响指数). 条形代表平均值±S。E.公司(n个=4). 箭头表示丙酸盐诱导自噬的细胞