图4

保存图片、插图等的外部文件。对象名称为nihms225230f4.jpg

膜交通的改变和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制的作用。()移动膜元件的双重染色是通过用Texas-red-conjugated HPA(外部,20μg/ml)同时作用于FasL(0.5μg/ml),如图3b.相同细胞的等分样品与50μ添加FasL之前的M z-VAD。固定后,用未标记的HPA(52μg/ml),渗透,然后用Alexa Fluor 488-HPA染色(静态HPA,2μg/ml,持续5分钟)。清洗和安装后,使用Deltavision RT反褶积显微镜获得图像,如图3c(40至60 z截面)。(b条)在与中相同的实验中,在稍后的时间点获得合并图像()并由34个z截面的去卷积投影导出。(c)FasL缺失和存在时Jurkat细胞HPA摄取和染色的时间进程(如). 细胞在37°C下在含有10μg/ml的德克萨斯红缀合的HPA;在指定的时间,细胞在冷态下离心,并在不含HPA的相同缓冲液中重新悬浮。计数后,将每个样品的40000个细胞装入四个孔中,并在平板读取器中测量残留荧光,如图3d双HPA染色的代表性图像,如()插入指定的培养时间。注意1小时内HPA摄取量的瞬时增加