图3

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网格蛋白介导的内吞作用对Atg16L1阳性自噬体前体的影响

A、 B、C、D。转染对照、epsin 1、clathrin重链、AP2或AP1 siRNA的HeLa细胞72 h后,用Hanks平衡盐溶液处理6 h(诱导自噬),然后固定并免疫染色内源性Atg16L1。定量了含有Atg16L1囊泡的HeLa细胞的百分比p<0.0001。比例尺–10μm。(请注意,我们在所有实验中使用了单个siRNAs,并且通过氯氰菊酯重链的两个独立序列证实了其效果)。n=600个电池。E.F.公司。将转染Flag标记野生型Atg16L1或Atg16L2缺失突变体-2-275或232-607 Atg16L的HeLa细胞固定24小时,并用抗Flag抗体进行模拟,定量并在图中表示带有Flag-Atg16L1囊泡的细胞比例。顶部面板显示了具有不同突变结构的Atg16L1囊泡的代表性图像。NS–不显著,***-p<0.0001。n=100个单元。G、 H,I。用GFP-Atg16L1和tomato-LC3进一步转染转染对照组、epsin 1、clathrin重链、AP2或AP1 siRNA的HeLa细胞24小时,然后固定细胞。GFP-Atg16L1(绿色)与tomato-LC3小泡(红色)共定位(黄色,用箭头标记)的百分比如图所示进行量化。n=21个单元格。***-p<0.0001。比例尺–10μm。图中的所有误差条都表示SEM。