Atg16L1与氯氰菊酯重链相互作用答：。用Atg16L1抗体（Atg16L2）或无抗体（no Ab）免疫沉淀HeLa细胞裂解物，进行SDS-PAGE，并根据制造商的方案用SimplyBlue安全染色（Invitrogen）对蛋白质进行染色。框中所示的条带被切下并用胰蛋白酶消化，并通过MALDIToF进行鉴定。B。将转染对照载体或Flag-Atg16L1野生型或不同缺失突变体（2-77、2-275、232-607）的HeLa细胞转染24小时后，用抗Flag抗体（Atg16L1）免疫沉淀，并用抗甲氰菊酯、抗Flag-和抗Atg5抗体免疫印迹。氯菊酯与Atg16L1的N末端相互作用，类似于Atg12-Atg5。将总裂解物作为蛋白质输入的对照。C、。HeLa细胞裂解物用Atg16L1抗体（+Ab）或无抗体（no-Ab）免疫沉淀（IP），用抗甲氰菊酯、抗AP2和抗Atg16L抗体免疫印迹。输入对照品的总细胞裂解物（TL）也被吸光。内源性Atg16L1与网格蛋白重链和AP2相互作用。D。转染Flag-Atg16L1和增加Atg5浓度24h的HeLa细胞用抗Flag抗体（Atg16L1）进行免疫沉淀（IP），并用抗氯氰菊酯、抗Flag和抗Atg5抗体进行免疫印迹。Atg5过度表达既不干扰也不增加氯菊酯-Atg16L1结合。TL–总细胞裂解物。
