CXCR4/CD74受体复合物的形成与CD74和CXCR4之间的功能相互作用相关。CXCR4抑制剂AMD3100以及抗CXCR4和抗CD74抗体阻断了Jurkat T细胞中MIF介导的AKT激活,而SDF-1α介导的AKT激活仅被抗CXCR4+而非抗CD74降低。(a) 流式细胞术直方图显示了CXCR4在Jurkat T细胞中的表面表达。对比抗CXCR4染色细胞(绿色)和非特异性FITC-IgG染色细胞(灰色)的荧光强度。(b) 流式细胞术直方图显示Jurkat T细胞中CD74的表面表达。比较抗CD74染色细胞(红色)和非特异性FITC-IgG染色细胞(灰色)的荧光强度。(c) 用AMD3100(1μg/ml,30 min;+AMD3100+)或对照缓冲液预处理的Jurkat细胞与指定浓度的rMIF孵育10 min,并使用磷酸化-Ser473-AKT抗体通过Western blot测定AKT活化。肌动蛋白染色用于印迹的标准化。(d) 根据(c)对印迹进行定量(磷酸化比率:AKT/肌动蛋白n个= 2). (e) 与c组相同,但Jurkat细胞用抗CD74、抗CXCR4抗体或对照IgG1预处理(每个10μg/ml,30分钟)。以100 ng/ml的浓度添加MIF,并用100 ng/ml SDF-1α刺激对照细胞。(f) 根据(e)(磷酸化比率:AKT/actin;平均值n个= 2).