RPS10的甲基化在RPS10高效组装成核糖体和蛋白质合成中起着重要作用。 A类如“实验程序”所述，通过超速离心分离细胞质多聚体。从转染FLAG标记WT的HEK293细胞中提取多聚体部分RPS10型或R158K/R160K突变体与pCMS。表皮生长因子。使用RPS10、GFP和GAPDH特异性抗体通过Western blotting分析收集的组分。吨,S公司、和P（P）分别代表总细胞裂解物、上清液和分离的多聚体。B类，通过ImageJ软件将与多聚体相关的外源性RPS10的分数定量分析计算为多聚体中的RPS10-FLAG/多聚体内的内源性RPS10-FLAG，并用总细胞裂解物中的RPS0-FLAG或总细胞裂解液中的内源性RP S10进行归一化。数值为三个独立实验，平均值±S.E(第页< 0.05).C类，多聚体剖面。转染48小时后，转染HEK293T细胞的总提取物RPS10型shRNA与任一SR-RPS10型-Myc或甲基化突变RPS10型用超速离心法进行5～45%线性蔗糖密度梯度沉淀。线性峰表示在254 nm处连续测量吸光度。D类，RPS10甲基化突变导致蛋白质合成速率降低。细胞被转染为C类在转染后.48小时，将培养基换成无Met培养基，补充有[35S] 会议。标记后1h收集细胞，然后进行SDS-PAGE分析。SDS-PAGE凝胶用考马斯蓝染色(左边,车道1，WT SR-RPS10/RPS10 shRNA；车道2，SR-RPS10甲基化突变/RPS10 shRNA），干燥，暴露于x射线胶片35S标记蛋白质(正确的,车道3和4对应于车道1和2).E类，中总蛋白合成的定量分析D类计算为35S放射性/总蛋白（考马斯蓝染色），使用ImageJ软件。数值为三个独立的实验平均值±S.E.（*，第页< 0.01).
