图4。

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PR域指示PI3K-Akt抑制和ASK1激活。在所有实验中,经LY或TNF-α处理后,用DAB2IP-F、AAA突变体或VC转染293个细胞,如图2. (A类)DAB2IP抑制了PI3K活动。使用p110抗体对细胞裂解产物进行IP检测,并通过ELISA检测PI3K活性。未经处理的VC细胞的相对PI3K活性正常化。用80μM LY处理的VC细胞作为阳性对照。所有数据(平均值±SEM)均一式三份。星号表示VC或AAA转染细胞与DAB2IP-F转染细胞的统计学意义(P(P)< 0.01). (B类)功能PR域指示Akt抑制。如前所述,对相对Akt活性进行了量化。数据(平均值±SEM)来自三个独立的实验。星号表示VC或AAA转染细胞与DAB2IP-F转染细胞的统计显著性(P(P)< 0.01). (C)DAB2IP隔离PI3K复合体在压力信号下。细胞裂解物用p85抗体IP,然后用p110抗体进行检测。在未经处理的DAB2IP-F细胞中,p110水平被视为基线,并计算每个样本的诱导倍数。一个星号表示在用LY或TNF-α处理的细胞中具有统计学意义(*,P(P)< 0.01). 两个星号表示转染DAB2IP-F的细胞与转染AAA的细胞(**,P(P)< 0.01). ()DAB2IP指示ASK1激活。与之前一样,对ASK1的相对活性进行了量化。数据(平均值±SEM)来自三个独立的实验。星号表示用VC或AAA转染的细胞与DAB2IP相比具有统计学意义(P(P)< 0.01).