图7

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细胞内细菌和DNA病毒诱导干扰素β需要Pol-III

(A) 野生型或MAVS缺失的BMDM细胞被感染嗜肺军团菌持续8小时。提取总RNA进行qPCR。IFN-β基因的表达水平与β-肌动蛋白基因的表达标准化。(B) 用指示浓度的ML-60218处理Raw264.7细胞10小时,然后感染嗜肺军团菌感染8小时后提取总RNA,进行干扰素-β和β-肌动蛋白的qPCR。(C) 从处理过的ML-60218中提取的RNA嗜肺军团菌-如(B)所述,将感染的Raw264.7细胞转染到Raw2647细胞中8小时。用qPCR检测IFN-β和β-actin的表达。(D) Raw264.7细胞被感染嗜肺军团菌持续8小时。制备细胞核和细胞溶质裂解物以提取RNA,将其转染到Raw264.7细胞中8小时。用qPCR检测IFN-β的表达,并将其归一化为β-肌动蛋白水平。(E) 用ML-60218处理Raw264.7细胞10小时,并感染嗜肺军团菌持续24小时。用0.1%皂苷溶解细胞,并将裂解产物涂布在BCYE琼脂平板上。培养2天后对菌落进行计数,显示为每1000个细胞的CFU。(F) Raw264.7细胞在存在或不存在小鼠IFN-β(1000U/ML)的情况下用ML-60218处理10小时,随后用嗜肺军团菌持续24小时。细菌菌落的测定如(E)所述。(G-I)Raw264.7细胞用ML-60218处理10小时,然后感染腺病毒(AdV;G)、单纯疱疹病毒-1(HSV-1;H)或仙台病毒(SeV;I)。提取总RNA用于干扰素-β和β-肌动蛋白的qPCR。(J) 用ML-60218处理产生EB病毒(EBV)的B95-8细胞24小时,然后制备总RNA用于qPCR。的表达式级别EBER1、EBER2、干扰素-βα-肌动蛋白基因与β-肌动蛋白RNA。α-和β-肌动蛋白都是Pol-II转录基因。