jbc的徽标The Journal of Biological Chemistry
PMC全文:

图4。

保存图片、插图等的外部文件。对象名为zbc034098263004.jpg

ALS-连锁TDP-43突变对毒性的影响。 A类,示意图显示上述疾病相关TDP-43突变。与WT相比,突变的色码表示毒性(红色=比WT毒性大得多;绿色=毒性略高于WT;黑色=与WT一样有毒)。B类用斑点试验比较WT和突变TDP-43的毒性。用半乳糖诱导的YFP、WT或突变TDP-43-YFP构建物转化的酵母细胞的系列稀释液。在含有葡萄糖(非诱导)或半乳糖(诱导)的琼脂平板上发现转化物,并在48–72小时后评估其生长情况。C类用斑点试验比较WT和突变TDP-43的毒性。用半乳糖诱导的未标记WT或突变TDP-43构建物转化的酵母细胞的系列稀释液。在含有葡萄糖(非还原性)或半乳糖(诱导性)的琼脂平板上发现转化物,并在48–72小时后评估其生长情况。D类,TDP-43诱导期间的存活曲线,使用高拷贝2μ载体。在诱导空载体TDP-43 WT、G294A、Q331K或M337V后,在指定的时间点通过在A类600纳米=1,稀释1:1000,并将300μl这些细胞接种到含有2%葡萄糖的合成培养基上(抑制TDP-43的表达)。平板在30°C下培养,2天后测定菌落形成单位。E类,TDP-43表达导致细胞死亡。诱导TDP-43表达6 h,并用碘化丙啶(PI)染色细胞以评估生存能力。表达WT和突变TDP-43的细胞在PI染色中呈阳性(表示细胞死亡),而含有空载体的细胞在P1染色中呈阴性(表示存活)。

本文中的图像

  • 图1。
  • 图2。
  • 图3。
  • 图4。
  • 图5。
  • 图6。
  • 图7。

单击图像以查看更大的版本。