图8

（A） 生长在补充不同初始谷氨酰胺浓度的培养基中的正常和转化细胞系中AKT蛋白的时程表达和磷酸化。为了进行蛋白质表达分析，在适当的时间点收集生长在含有4mM谷氨酰胺和0.5mM谷氨酰胺的培养基中的正常细胞和转化细胞，并对总细胞提取物中的50µg蛋白质进行SDS-PAGE，然后用特定的抗磷酸化蛋白进行Western blotting^Ser473系列AKT（p-AKT）抗体和抗AKT抗体。（B） 在补充不同初始谷氨酰胺浓度的培养基中生长的正常细胞系和转化细胞系中AMPKα蛋白的时程表达和磷酸化。为了进行蛋白质表达分析，在适当的时间点收集生长在含有4mM谷氨酰胺、1mM谷氨酰胺和0.5mM谷氨酰胺的培养基中的正常细胞和转化细胞，并对总细胞提取物中的50µg蛋白质进行SDS-PAGE，然后用特异性抗磷酸化蛋白进行Western blotting^Thr172电话AMPK（p-AMPK）抗体和抗AMPK抗体。（C） S6K蛋白在正常和转化细胞系中的时程表达和磷酸化，如B所述。通过使用特异性抗磷酸化^通过389S6K（p-AKT）抗体和抗S6K（S6K）抗体。这些面板代表了三重分析（Akt和AMPK）或重复分析（S6K）。