图6

如前所述，对正常（A）和转化（B）细胞系进行铺板。24小时后（表示为0小时），用正常培养基−4 mM谷氨酰胺-，然后在指定时间收集细胞并计数。在含有10%血清、4 mM或0.5 mM谷氨酰胺、dNTPs和BrdU的培养基中释放正常（左面板）和转化（右面板）细胞，并同步24小时血清饥饿，以进行连续DNA标记。在指定的时间点收集细胞，用碘化丙啶和抗BrdU特异性抗体进行染色，并用流式细胞仪进行分析。分别获得异步和0小时（时间0）时间点样本的代表性细胞图，绘制BrdU含量（标记细胞）与。PI染色（DNA含量）(图6 C-正常细胞和D转化细胞）。图中的红色表示S相电池。G中细胞的百分比₁（面板E和F）、S（面板G和H）和G₂/M（面板I和L）、在4 mM和0.5 mM谷氨酰胺中释放的正常（左侧面板）和转化（右侧面板）细胞的相，或通过上述双参数分析获得的加上dNTP的相。星号表示S或G₂/在两种谷氨酰胺可用性中确定了M相峰值。误差条对应于三份分析的标准偏差。