图5

用分光光度法测定用TRIzol溶液提取的总RNA以及生长在4 mM谷氨酰胺（A、C和E）和0.5 mM谷氨酸（B、D和F）中的正常细胞和转化细胞的不同裂解缓冲液（蛋白质），计算出单个细胞的总RNA、蛋白质数量和RNA/蛋白质比率。将正常（G）和转化（H）细胞系以3000个细胞/厘米的速度培养²在正常培养基中的6孔板中。24小时后，将培养基替换为正常培养基−4 mM谷氨酰胺-（б）、低培养基−的0.5 mM谷氨酸-（□）、含有0.5 mM谷酰胺和2 mM丙酮酸盐（↓）的培养基以及含有0.5 mM-谷氨酰胺和2 m M苹果酸盐（○）的培养液，然后在指定时间收集细胞并进行计数。在4 mM（I）、1 mM（L）和0.5 mM谷氨酰胺可用性（M）条件下，使用荧光素-荧光素酶法沿时间进程测量两种细胞系中的ATP含量。根据ATP标准校准ATP浓度，并以每10.000个细胞的纳米数表示。在所有实验中，至少有三个独立实验的平均值都用误差条表示SD。