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图2。

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PDAC导管细胞中的平滑细胞被耗尽前/后老鼠。(A类)重新组合平滑(Smo)PDAC细胞系中的位点。PCR扩增平滑(Smo)基因座(Smo)或p48-Cre转基因(p48)。这个平滑(Smo)基因分型程序放大非结合条件平滑(Smo)如果等位基因(上带,F)和野生型(wt)平滑(Smo)等位基因(低带,野生型)。当Cre重组平滑(Smo)条件位点。每个PCR反应中使用的输入基因组DNA表示为:(Tail)来自小鼠尾部的基因组DNA,100 ng;(细胞)来自PDAC衍生的肿瘤细胞系的基因组DNA,10ng;(+/+)平滑(Smo)+/+; (F/+)平滑(Smo)F类/+; (前/后)平滑(Smo)前/后. (B类)耗尽平滑(Smo)mRNA在重组细胞系中的表达。总RNA提取物中Smo mRNA的表达平滑(Smo)+/+(W) ,平滑(Smo)F类/+(H) ,或平滑(Smo)前/后(F) PDAC细胞系。mRNA水平以m-Gus对照mRNA的百分比表示。对每个基因型的两个细胞系的总RNA提取物进行三次分析。(C类)体内重组平滑(Smo)轨迹。通过激光捕获显微切割(LCM)从PDAC肿瘤中分离出的导管结构或间质区域的基因组DNA进行与A类将每个基因型的两个PDAC肿瘤的导管或间质区合并,并进行PCR扩增。每个PCR反应中使用的输入基因组DNA表示为:(尾部)来自小鼠尾部的DNA;(导管)LCM捕捉到两个PDAC肿瘤的导管;(基质)LCM捕捉到两个PDAC肿瘤的基质丰富区;(+/+)平滑+/+; (F/+)平滑F类/+; (F/F)平滑前/后. (D–G型)体内Smo蛋白耗竭。Smo(绿色)和Muc-1(红色)的免疫荧光检测(630×)。在PDAC Smo内的一组粘蛋白阴性导管中检测到Smo蛋白F类/+PanIN样病变(D类)但不存在于粘蛋白阳性导管(白色箭头)和粘蛋白阴性PDAC Smo中F类/+腺癌病变(E类). 在PDAC Smo中无法检测到Smo前/后PanIN样病变(如果)或PDAC Smo前/后腺癌(G公司). 单个PDAC Smo的颗粒细胞质Smo染色F类/+电池(2520×)(D类,插入)个人PDAC Smo中缺失前/后单元格(如果,插入). 这些面板代表了三个PDAC Smo胰腺切片的多个区域F类/+小鼠和三个PDAC Smo前/后老鼠。

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