赖氨酸缺陷突变体TRAF6可在TRAF6缺陷的成纤维细胞中拯救IL-1介导的NFκB和MAPK活化以及IL-6的产生。（A） 在所有赖氨酸残基（称为TRAF6 K32-518R或TRAF6ΔK）处产生了一个含有赖氨酸（K）到精氨酸（R）突变的全长TRAF6的突变版本，并且突变与TRAF6结构域位置有关。（B） TRAF6缺陷的成纤维细胞用指定的全长版本的FLAG-TRAF6逆转录病毒拯救，然后用FLAG免疫沉淀裂解物，并进行在体外在有或无ATP的情况下，使用重组K63泛素进行泛素化。最后两个通道代表免疫沉淀前混合1∶1的C70A和K32-518R裂解物，以评估TRAF6单体的转泛素化潜力。用抗TRAF6免疫印迹法检测未修饰和修饰的TRAF6。（C） 用IL-1β处理（B）中使用的细胞株5分钟，然后在N-乙基马来酰亚胺（NEM）存在下裂解，并用抗TRAF6进行免疫印迹，以检测未修饰和高分子量形式的TRAF6。（D） ，（E）TRAF6缺陷的成纤维细胞与指定的全长版本的FLAG-TRAF6逆转录病毒再融合后，按照IL-1β的指示进行处理，然后进行裂解，并对活化的磷酸化形式的TAK1（D）、IKKα/β（D）IκBα（E）、JNK（E）和p38（E）进行免疫印迹。（F） TRAF6缺陷的成纤维细胞用指定的全长版本的FLAG-TRAF6逆转录病毒复性后，未经治疗或用IL-1β治疗12小时。收集上清液并通过ELISA检测其IL-6生成。数值标准化为细胞培养板的结晶紫分析。
