图6。

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Atg4B细胞自噬膜的超微结构分析C74A型-过度表达的细胞。稳定表达空载体(Mock)(A–E)或mStrawberry-Atg4B的NIH3T3细胞C74A号(F–J)在HBSS中培养1h,固定,并进行常规电子显微镜分析。(B–E)模拟细胞中的典型自噬结构;隔离膜(B)、自噬体(C–E)。(G–J)mStrawberry-Atg4B中的典型自噬结构C74A号-表达细胞;隔离膜(G和H)、闭合双膜结构(I和J)。图中显示了电子致密结构(黑色箭头)、闭合自噬膜(白色箭头)和开放自噬薄膜(白箭头)的示例。条形,500 nm。(K) 模拟和mStrawberry-Atg4B中自噬结构的数量C74A号-表达细胞。▩, 开放自噬结构;■, 封闭的自噬结构。数据是代表性实验的三倍平均值±SD。(五十) 开放结构与总自噬结构的比率。数据是代表性实验的三倍平均值±SD*p<0.05。(M) 模拟和mStrawberry-Atg4B中自噬膜的长度C74A号-表达细胞。▩, 开放自噬结构;■, 封闭的自噬结构。对于自噬膜的长度测定,使用ImageJ版本1.40(http://rsb.info.nih.gov/ij/). 所示值为平均值±SD。每个结构至少检查了20个样品*p<0.05;NS,不显著。(N) 模拟和mStrawberry-Atg4B中开放与闭合自噬结构的长度之比C74A号-表达细胞*p<0.05。(O) 表达GFP-Atg5和mStrawberry-Atg4B的NIH3T3细胞C74A号在HBSS中生长1小时并固定。使用抗GFP抗体通过金增强免疫金电镜检查GFP-Atg5的定位。条形,500 nm。