图3。

保存图片、插图等的外部文件。对象名为zmk0110887680003.jpg

过量Atg4B之间稳定的复合物形成C74A号和LC3阻止访问Atg7。(A) 293A细胞稳定表达空载体(Mock)或mStrawberry-Atg4BC74A号(附件4BC74A号)用Myc-LC3-HA(WT)或Myc-LC3转染G120A型-HA(GA)。转染后36小时,细胞在生长培养基或HBSS中培养2小时,并进行Western blotting。从顶部面板,抗RFP、抗Myc和抗α-微管蛋白。(B) PC12细胞用携带3xFlag标记的野生型Atg4B(WT)、Atg4B的腺病毒感染C74A号(CA)或Atg4BC74S公司(CS)。培养40h后,用抗Flag M2结合琼脂糖珠对细胞裂解物进行免疫沉淀。使用每个抗体通过Western blotting检测共免疫沉淀分子。从顶部面板,反旗帜、反LC3和反GATE16。显示了总细胞裂解物(输入)和免疫沉淀蛋白(IP)。(C) 293A细胞稳定表达空载体(Mock)或mStrawberry-Atg4BC74A号(附件4BC74A号)如图所示,转染GFP-LC3和Myc-Atg7。转染后36小时,使用每种抗体通过Western blotting检测细胞裂解物。从顶部面板,抗RFP、抗myc、抗GFP和抗α-微管蛋白。