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图4

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完整微管在MDCK克隆II/G和II/J细胞极性发育期间将新合成的gp80靶向质膜的作用。按照材料和方法中的描述建立融合MDCK克隆II/G和II/J培养物。如图所示图3A,A、 培养物在诺克唑不存在(−noc)或存在(+noc)的条件下培养。在37°C的最后一个小时,培养物被代谢标记为[35S] 蛋氨酸/半胱氨酸。代谢标记期结束后,从过滤器的顶部和底部室收集培养基。通过SDS-PAGE分离分泌蛋白,以监测新合成的gp80在诱导细胞-细胞接触(10–120 h)后的指定时间传递到顶端(Ap)和基底外侧(BL)表面。(A) 给出了每个时间点代表性样品的荧光检测结果。使用分子动力学荧光成像仪(820型)直接测定凝胶中标记的gp80的量。MDCK克隆II/G(B)和克隆II/J(C)细胞的蛋白质的扫描密度测定结果显示为在没有诺可唑的情况下新合成的gp80总量的百分比(递送百分比)。条形图描述了两到九个独立实验的平均值,每个实验都由散点图中的一个符号表示。

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