图1

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诱导细胞-细胞接触后不同时间MDCK克隆II/G和II/J细胞微管的共焦图像(立体对)。通过在含有5μM Ca的DMEM/FBS中胶原蛋白涂层聚碳酸酯过滤器上以汇合密度接种“接触-活性”细胞,建立了MDCK克隆II/G(A–E)和II/J(F–J)的汇合培养物2+随后通过升高Ca启动同步电池-电池接触2+培养基浓度为1.8 mM。在诱导细胞-细胞接触后的指定时间,按照材料和方法中的描述,用抗α-和β-微管蛋白的单克隆抗体固定并处理样品进行免疫荧光。使用0.2μm的z步长从每个样本收集的序列图像中生成立体成对图像堆栈。(E) 将图像堆栈的前8μm从96小时克隆II/G细胞样品的立体对中移除,以便可以轻松查看皮层微管的组织。棒,10μm。