Der3p的细胞内定位。（A） Der3p公司与ER驻留蛋白Kar2p共分馏。球原生质体携带高拷贝质粒YEpDER3的W303–1C（野生型）菌株制备，在温和溶解后，匀浆在10步蔗糖梯度上分馏（18–54%，4%步蔗糖）。对每一组分的等分样品进行SDS-PAGE和蛋白质印迹。Der3p、Kar2p（ER标记）和100-kDa的水平液泡膜ATP酶亚基用各自的特异性抗体。高尔基体标记物GDPase的活性，以测量的最高活动值的百分比给出。（B）Der3p定位于类ER结构。指数增长的细胞用2μ质粒YEpDER3转化的菌株W303-1C的用多克隆抗Der3p抗体和山羊进行固定和染色抗兔Cy3抗体。用激光监测Cy3荧光共焦显微镜（Cy3，Cy3荧光；DIC，Nomarski光学）。（C）当从基因的染色体拷贝表达Der3p时与Kar2p共分馏。亚细胞分馏如下在A中使用菌株W303–1C。用于检测Der3p，每种500μl用10 mM HEPES（pH 7.5）将部分稀释至10倍将100000 g膜芯（1 h）重新悬浮在尿素缓冲液中加载到8%SDS-聚丙烯酰胺凝胶上。免疫印迹后检测到Der3p和Kar2p带有合适的抗体。仅显示分数1-8；没有乐队可以在分数9-17中检测到。
