PIAS3通过ARE逆转ATF1介导的人铁蛋白H转录抑制一个,1 × 107用0.5μg-4.5-kb（ARE+）或-4.4-kb的铁蛋白H-荧光素酶加0.25μg或0.5μg pCMVFLAG-PIAS3电穿孔K562细胞（通过添加pCMVFLAG空载体，质粒DNA总量达到1μg）。36小时后收集细胞，并测量荧光素酶活性。萤火虫荧光素酶的表达通过雷尼利亚荧光素酶，不含PIAS3的-4.5-kb铁蛋白H-荧光素酶的值定义为100%。给出了三个独立实验的结果和标准误差。B类,1 × 107用0.5μg-4.5-kb铁蛋白H-荧光素酶和1μg pCMV-HAATF1以及不同量（0.25、0.5和1μg）的pCMVFLAG-hPIAS3电穿孔K562细胞。转染36 h后制备细胞裂解物，并进行荧光素酶分析和HA-ATF1蛋白印迹(底部). 通过将no ATF1、no PIAS3（转染空载体）的荧光素酶读数设置为100%，确定荧光素素酶表达的折叠诱导，并显示三个独立实验和标准误差。C类使用Jet-PEI转染试剂，用50 ng的-4.5（+ARE）或-4.4（-ARE）铁蛋白H-荧光素酶启动子以及指定数量的HA-ATF1和/或FLAG-PIAS3表达载体转染293细胞。通过添加pCMV空载体，每次转染的质粒DNA总量等于500 ng。转染48 h后，收集细胞进行荧光素酶分析和HA-ATF1蛋白印迹。-4.5kb ARE（+）报告基因与空载体的萤光素酶值被定义为100%。给出了四个独立实验的平均值和标准误差。
