图1。

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Atg12和Atg3之间的相互作用在LC3脂质化中的作用。(A) PC12细胞要么未经处理,要么用携带Atg12(12)、Atg5(5)或Atg16L(16L)的腺病毒感染。培养40h后,细胞在HBSS(饥饿)中培养2h并收集。用抗LC3抗体进行Western blotting检测裂解产物。(B) HEK293A细胞与Myc标记的LC3和Atg12瞬时共转染G140A型或Atg12G140A,F108双突变体(F108A、F108L或F108D)。用每种抗体对裂解液进行免疫印迹。顶部面板,抗Atg12;中间面板,抗myc;底部面板,抗α-微管蛋白。(C) 用3xFlag标记的Atg3和Atg12瞬时转染HEK293A细胞G140A型或Atg12G140A,F108双突变体(F108A、F108L或F108D)。将裂解液进行抗标记免疫沉淀,并使用每个抗体通过Western blotting检测免疫复合物。顶部面板,防旗;中间面板,抗Atg12;底部面板,抗Atg5。(D) 如图所示,使用重组腺病毒组合共感染PC12细胞。培养40小时后,收集细胞。使用每种抗体通过Western blotting检测裂解液样本。从顶部面板来看,抗Flag、抗RFP、抗LC3和抗α-微管蛋白。