图5。

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自噬需要FIP200。(A)FIP200型+/+,FIP200型−/−,附件5+/+、和附件5−/−MEF在完全培养基或饥饿培养基中培养60分钟。在恢复实验中,饥饿的MEF在新鲜完全培养基中再培养60分钟(补充)。用所示抗体对细胞裂解物进行免疫印迹分析。(B) 野生型和FIP200型−/−MEF在完全培养基或饥饿培养基中培养指定时间,添加或不添加100 nM巴非霉素A1用抗LC3抗体对细胞裂解物进行免疫印迹分析。(C) 野生型和FIP200型−/−用编码GFP-Atg5或GFP-LC3的逆转录病毒载体转染MEF。结果细胞在饥饿培养基中培养120分钟。细胞固定并通过荧光显微镜检查。棒材,20μm。(D–G)野生型(D和E)和FIP200型−/−(F和G)MEF在完全培养基(D和F)或饥饿培养基(E和G)中培养120分钟,然后固定并进行EM分析。图示为自噬体样结构(开放箭头)和自溶体(闭合箭头)。棒材,1μm。(H) 通过形态计量分析测定D-G细胞自噬体(AP)和自溶体(AL)的总面积与总细胞质面积的比值。