图3。

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组成活性Akt促进葡萄糖摄取不是通过调节谷氨酸1蛋白水平,而是通过促进谷氨酸1细胞表面定位。(A) 对照组(Neo)和mAkt表达的IL-3依赖细胞在有IL-3或无IL-3的情况下培养5或10小时。然后采集细胞,测量其摄取不可水解葡萄糖类似物2-DOG的能力。所示值是三份样品结果的平均值;误差线表示标准偏差。(B) 通过Western blot分析对照细胞和mAkt细胞在IL-3存在或退出IL-3 10 h后葡萄糖转运蛋白谷氨酸1的表达。每条通道都装载了10μg蛋白质。(C) 对照(Neo)和mAkt细胞在有IL-3的情况下和无IL-3的10小时后通过免疫荧光染色进行谷氨酸1定位。每个显微照片都进行了单独的对比,以实现谷氨酸1定位的最佳可视化。条形代表5μm。(D) 在有IL-3存在的情况下或在没有IL-3的情况下12小时后,从对照细胞和mAkt表达细胞中分离出质膜,并通过Western blot分析10μg蛋白质的细胞表面谷氨酸1的表达。